Feulgen 富爾根染色是一種用于檢測(cè) DNA 的經(jīng)典染色方法，以下是其相關(guān)介紹：

基本原理

水解反應(yīng)：利用 1M HCl 在 60℃下水解，使 DNA 分子中嘌呤堿基與去氧核糖之間的糖苷鍵打斷，嘌呤脫下，去氧核糖 C-1 位置釋放出醛基。

顯色反應(yīng)：席夫試劑中的堿性品紅原為桃紅色，與亞硫酸作用時(shí)被氧化，醌型變?yōu)楸叫?，成為無(wú)色透明的 N - 亞磺酸亞硫酸副品紅堿。當(dāng)與 DNA 水解產(chǎn)生的醛基作用時(shí)，其分子式恢復(fù)為醌型結(jié)構(gòu)，呈現(xiàn)紫紅色。

操作步驟

取材與固定：選取合適的組織或細(xì)胞樣本，如植物根尖、動(dòng)物組織切片等，常用卡諾氏固定液等進(jìn)行固定，以保持細(xì)胞形態(tài)和 DNA 的完整性。

脫蠟與水化：如果是石蠟切片，需要先進(jìn)行脫蠟處理，用二甲苯等試劑去除石蠟，然后依次經(jīng)過(guò)不同濃度的酒精溶液進(jìn)行水化，使組織回到水溶液狀態(tài)。

水解：將標(biāo)本放入預(yù)熱至 60℃的 1M HCl 中水解適當(dāng)時(shí)間，一般為 8-10 分鐘，水解時(shí)間需根據(jù)不同的組織類型和固定劑進(jìn)行優(yōu)化。

水洗：水解完成后，用自來(lái)水或蒸餾水沖洗標(biāo)本，去除多余的鹽酸。

染色：加入席夫試劑，在暗處染色 30-60 分鐘，使釋放出的醛基與席夫試劑充分反應(yīng)，形成紫紅色產(chǎn)物。

漂洗：從席夫試劑中取出標(biāo)本，用亞硫酸水溶液漂洗，去除未結(jié)合的席夫試劑，一般漂洗 5-10 分鐘。

水洗：再用自來(lái)水或蒸餾水沖洗，去除殘留的亞硫酸水溶液。

脫水、透明與封片：依次用不同濃度的酒精進(jìn)行脫水，然后用二甲苯等透明劑進(jìn)行透明處理，最后用樹(shù)脂等封片介質(zhì)將標(biāo)本封片，以便于顯微鏡觀察。

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